人血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒

　　人血管生长素(Angiogenin)ELISA试剂盒操作步骤

　　1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。

　　3、 待测样本孔先加样本10μL，再加样本稀释液40μL(即样本稀释5倍)；空白孔不加。

　　4、 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　5、 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

　　6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

　　7、 每孔加入终止液50μL，15min内在450nm波长处测定各孔的OD值。

　　注意事项

　　1、试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶完全溶解后再使用。

　　2、实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封（低温干燥）保存。

　　3、浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白；按照说明书操作时样本已经稀释5倍，最终结果乘以5才是样本实际浓度。

　　4、严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。

　　5、所有液体组分使用前充分摇匀。

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